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      8. 液相色譜圖問題分析及解決辦法

        發(fā)布于 2011/03/04閱讀(3563)來源 zxj

        摘要

        液相色譜圖問題分析及解決辦法

        內(nèi)容

        A、峰拖尾
        1、篩板阻塞:a、反沖色譜柱b、更換篩板c、更換色譜柱
        2、色譜柱塌陷:填充色譜柱
        3、干擾峰:a、使用更長的色譜柱b、改變流動相或更換色譜柱
        4、流動相pH選擇錯誤:調(diào)整pH值。對于堿性化合物,低pH值更有利于得到對稱峰
        5、樣品與填料表面的活性點發(fā)生反應(yīng):a、加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾b、更改色譜柱

        B、峰前延
        1、柱溫低:升高柱溫
        2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng):使用流動相作為樣品溶劑
        3、樣品過載:3、降低樣品含量
        4、色譜柱損壞:見A1、A2

        C、峰分叉
        1、保護(hù)柱或分析柱污染:取下保護(hù)柱再分析。也可更換保護(hù)柱。拆下來清洗。如果問題仍然存在,可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染,可運用適當(dāng)?shù)脑偕胧?。若還不行,可能是入口處堵,可以更換篩板或色譜柱。
        2、樣品溶劑不溶于流動相:改變樣品溶劑,如果可能,采取流動相作為樣品溶劑

        D、含量高的成分峰
        1、樣品溶劑選擇不恰當(dāng):減少樣品載量

        E、早出的峰變形
        樣品溶劑選擇不恰當(dāng):a、減少進(jìn)樣體積b、運用低極性樣品溶劑

        F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
        柱外效應(yīng):a、調(diào)整系統(tǒng)連接(使用更短、內(nèi)徑更小的管路)b、使用小體積的流通池

        G、K′增加時,脫尾更嚴(yán)重
        1、二級保留效應(yīng),反相模式:a、加入三乙胺 b、加入乙酸c、加入鹽或緩沖劑d、更換一支柱子
        2、二級保留效應(yīng),正相模:a、加入三乙胺 b、加入乙酸
        c、加入水 d、試用另一種方法
        3、二級保留效應(yīng),離子對:加入三乙胺

        H、酸性或堿性化合物的峰拖尾
        緩沖液濃度不合適:a、使用濃度50-100mmol/L的緩沖液b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液

        I、額外的峰
        1、樣品中有其他組分:正常
        2、前一次進(jìn)樣的洗脫峰:a、增加運行時間或梯度b、使用pH等于流動相pH的緩沖液
        3、空位或鬼峰: a、檢查流動相否純凈b、使用流動相作為樣品溶劑c、減少進(jìn)樣體積

        J、保留時間波動
        1、溫控不當(dāng):重新設(shè)定柱溫
        2、流動相組分變化:防止變化(蒸發(fā)、反應(yīng)等)
        3、色譜柱沒有平衡:在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱

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