摘要
HPLC法測(cè)定脂溶性維生素分析方法：樣品中的維生素A 及維生素E 經(jīng)皂化處理后，將其不可皂化部分提取至有機(jī)溶劑中。用高效液相色譜法C18反相柱將維生素A 和維生素E 分離，經(jīng)紫外檢測(cè)器檢測(cè)，并用內(nèi)標(biāo)法定量測(cè)定。
內(nèi)容
HPLC法測(cè)定脂溶性維生素分析方法
高效液相色譜分析
1.色譜條件(推薦條件)
預(yù)柱：hypersil ODS 5μm，4mm×10cm；
分析柱：hypersil ODS 5μm，4.6mm×25cm ；
流動(dòng)相：甲醇：水=98：2；混勻，于臨用前脫氣；
紫外鹼測(cè)器波長：300nm；量程0.02；
進(jìn)樣量：20μL 進(jìn)樣定量環(huán)；
流速： 1.65~1.70mL/min
2.樣品分析
取樣品濃縮液20μL，待繪制出色譜圖及色譜參數(shù)后，再進(jìn)行定性和定量。
定性：用標(biāo)準(zhǔn)物色譜峰的保留時(shí)間定性。
定量：根據(jù)色譜圖求出某種維生素峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值，以此值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其含量?；蛴没貧w方程求出其含量。
3，計(jì)算
X=C/m×V×100/1000
X—某種維生素的含量(mg/100g)；
C—由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到某種維生素含量(μg/mL)；
V—樣品濃縮定容體積(mL)；
m：樣品質(zhì)量(g)。
用微處理機(jī)二點(diǎn)內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算時(shí)．按其計(jì)算公式計(jì)算或由微機(jī)直接給出結(jié)果。結(jié)果的允許測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏差絕對(duì)值≤10%
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