透射及掃描電鏡操作規(guī)程
一、實驗?zāi)康模?br /> 1、了解透射電鏡、掃描電鏡各部件的名稱、結(jié)構(gòu)及性能；
2、了解透射及掃描電鏡的基本操作程序；
3、了解電鏡樣品制備的配套設(shè)備。
二、實驗儀器及用品：
透射電鏡；掃描電鏡；小白鼠肝臟超薄切片；酵母菌或乳酸桿菌的負(fù)染樣品；噴好金膜的葉片及花粉樣品
三、方法步驟：
（一）透射電鏡操作規(guī)程：
1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規(guī)程，通過操作考試后才能正式上機(jī)操作。
2、操作程序
1）開機(jī)準(zhǔn)備
（1） 合上總電源閘刀，開啟電子交流穩(wěn)壓器，電壓指示應(yīng)為220V。開啟循環(huán)水，溫度指示應(yīng)為15-20℃。
（2） 開啟主機(jī)真空開關(guān)。
（3） 約20分鐘后，待高真空指示燈及照相室指示燈亮。
2）工作程序
（1）開啟主機(jī)電源開關(guān)，待熒光屏顯示操作數(shù)據(jù)后再進(jìn)行下一步。
（2）逐級加高壓致所需電壓，每加一級高壓，必須等高壓表中指示針停止擺動才能加下一級。如指示針移出量程，必須從最低移級加起。
（4） 根據(jù)說明書要求進(jìn)行合軸操作，使儀器處于最佳操作狀態(tài)。
（4）根據(jù)說明書的操作要求進(jìn)行觀察、換樣和拍照。
（5）作好實驗記錄及儀器使用記錄。
3）關(guān)機(jī)程序
（1）關(guān)燈絲電流。
（2）關(guān)高壓。
（3）關(guān)主機(jī)電源開關(guān)。
（4）關(guān)真空開關(guān)。
（5） 20分鐘后，關(guān)循環(huán)水和電子交流穩(wěn)壓器開關(guān)。
（6） 關(guān)閉總電源。
（二）掃描電鏡操作規(guī)程：
1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規(guī)程，通過操作考試后才能正式上機(jī)操作。
2、操作程序
1）開機(jī)準(zhǔn)備
（1）合上總電源閘刀，開啟電子交流穩(wěn)壓器，電壓指示應(yīng)為220V。開啟冷卻循環(huán)水裝置電源開關(guān)。
（2）開啟試樣室真空開關(guān)（VACUUM POWER），開啟試樣室準(zhǔn)備狀態(tài)開頭（STAND BY）。
（3）開啟控制柜電源開關(guān)（POWER）.
（4）約20分鐘后，往試樣室液氮冷井中加入液氮。
2）工作程序
（1）開啟試樣室進(jìn)氣閥控制開關(guān)（CHAMB VENT），將試樣放入試樣室后將試樣室進(jìn)氣閥控制開關(guān)（CHAMB VENT）關(guān)閉抽真空。
（2）開啟鏡筒真空隔閥。
（3）加高壓（ACCELERATION POTENTIAL）至25KV.
（4）加燈絲電流（FILAMENT）至7.5-8.
（5）調(diào)節(jié)顯示器對比度（CONTRAST）、亮度（BRIGHTNESS）至適當(dāng)位置.
（6）將圖象選區(qū)開關(guān)撥至全屏（FULL）.
（7）調(diào)節(jié)聚焦旋鈕（MEDIUM）和(FINE)至圖象清晰。
（8）選擇適當(dāng)?shù)膾呙杷俾剩⊿CAN RATE）觀察圖象。
（9）根據(jù)說明書的操作要求進(jìn)行觀察和拍照。
（10）作好實驗記錄及儀器使用記錄。
3）關(guān)機(jī)程序
（1）關(guān)燈絲電流（FILAMENT）。
（2）關(guān)高壓（ACCELERATION POTENTIAL）。
（3）反時針調(diào)節(jié)顯示器對比度（CONTRAST）、亮度（BRIGHTNESS）到底.
（4）關(guān)閉鏡筒真空隔閥。
（5）關(guān)主機(jī)電源開關(guān)。
（6）關(guān)真空開關(guān)。
（7）20分鐘后，關(guān)循環(huán)水和電子交流穩(wěn)壓器開關(guān)。
（8）關(guān)閉總電源。
四、觀察結(jié)果：
1、小白鼠肝臟超薄切片：一般可見細(xì)胞膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、肌纖維等結(jié)構(gòu)。
2、酵母菌或乳酸桿菌的負(fù)染樣品：由于重金屬鹽在樣品周圍的堆積而使樣品顯示負(fù)的反差，從而襯托出樣品的形態(tài)和大小。酵母菌近球型，有時可見出芽生殖；乳酸桿菌為桿狀。
3、葉片在掃描電鏡下一般可見上表皮有各種紋飾，下表皮可見氣孔器形態(tài)
4、花粉在掃描電鏡下一般可見表面的萌發(fā)溝和紋飾。
觀察過程中尋找典型部位進(jìn)行拍照。