秘訣1：由強到弱： 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗， 這樣可以很快地得到分離結果，然后根據(jù)出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。

秘訣2 三倍規(guī)則 ：每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規(guī)則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意觀察各個峰的分離情況。

秘訣3 粗調轉微調：當分離達到一定程度，應將有機溶劑10%的改變量調整為5%，并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調整率，直至各組分的分離情況不再改變。